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关于PCR实验室的介绍

来源:本站 发布时间:2024-11-27 点击数:5

PCR实验室目前已广泛应用于生物学各个领域,例如艾滋病、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断、DNA指纹、个体识别、亲子鉴定、法医物证、动植物检疫、动物及其衍生产品检测、动物饲料、化妆品、食品卫生检测、转基因作物与转基因微生物检测等。

工艺要求

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PCR实验室主要由四个工作区域组成的,也就是试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区。

工作内容如下:

(1)试剂准备区-安全为首要

试剂准备区的主要工作是完成试剂和主反应混合液的储存、配制和封装等。所有运送到试剂准备区的试剂和材料不应经过其他区域,试剂和原材料应在本区内储存和制备,试剂准备区的气压相对外界应保持正压。

(2)标本制备区

标本制备区的工作主要是样本的保存、核酸提取和贮存、样本加入扩增反应管和测定DNA的合成等;样本应直接运送并储存在本区域内,不应经过其他区域 。

对于气流压力的控制,由于在标本制备区内加样操作可能会产生气溶胶,为避免气溶胶的扩散和污染,标本制备区对外界应保持负压。从质量控制的角度出发,标本制备区相对于扩增反应混合物配制和扩增区以及扩增产物分析区为正压,以避免从邻近区域进入本区域的气溶胶污染。但当涉病原微生物时,标本制备区GB 19489-2008《实验室生物安全通用安全》对BSL-2实验室的各项安全要求,此时本区相对于扩增区应为负压,故涉及病原微生物操作时,在综合考虑质量控制、生物安全因素的前提下,整体上标本制备区与扩增区的压力应持平,即均为负压,两个相邻区域之间的负压值基本上是相当的。

(3)扩增区

扩增区的主要工作是DNA扩增和扩增片段的测定。此外反应混合液制备成反应混合液和已制备的DNA模板的加入等也均可在本区域内进行。对于气流压力的控制,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区域漏出造成污染。

(4)产物分析区

产物分析区的主要工作是扩增产物的分析。对于气流压力的控制,该区域是PCR实验的最后一步,压力应为最低,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出造成污染。

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